行測常識判斷考點范圍很廣,一般包括政治、法律、經(jīng)濟、人文、地理、科技、生活等方面,需要小伙伴們長時間不間斷的積累。今天河北公務(wù)員考試網(wǎng)(m.neijiangbmsg.com)給大家?guī)淼某WR相關(guān)考點是“生物基因工程”。
基因工程是指按照人們的愿望,進行嚴格的設(shè)計,通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?;蚬こ淌窃贒NA分子水平上進行設(shè)計和施工的,又叫做DNA重組技術(shù)。
操作水平:DNA分子水平
原理:基因重組
優(yōu)點:1.突破物種界限。 2.定向改造生物的遺傳特性。
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1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)
(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。
?。?)功能:能夠識別特定的核苷酸序列,并在特定的切點切割,因此具有專一性。
?。?)作用的化學鍵:切割磷酸二酯鍵。
(4)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。
2.“分子縫合針”——DNA連接酶
(1)作用:將兩個具有相同粘性末端的DNA片段連接起來,形成重組DNA
?。?)連接的化學鍵:磷酸二酯鍵
?。?)與DNA聚合酶作用的異同:
DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。
DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。
3.“分子運輸車”——運載體
(1)載體具備的條件:
?、倌茉谑荏w細胞中復制并穩(wěn)定保存。
?、诰哂幸恢炼鄠€限制酶切點,供外源DNA片段插入。
?、劬哂袠擞浕?,供重組DNA的鑒定和選擇。
(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種環(huán)狀DNA分子。
(3)其它載體:噬菌體、動植物病毒
(二)基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的獲取
1.從基因文庫中獲取(不知道目的基因的核苷酸序列的情況下采用)
2.人工合成。常用方法有:
?。?)反轉(zhuǎn)錄法(已經(jīng)獲得mRNA的情況下采用)
?。?)化學合成法(知道目的基因的核苷酸序列、基因比較小的情況下采用)
3.PCR技術(shù)擴增目的基因(知道目的基因兩端的核苷酸序列、基因比較大的情況下采用)
(1)PCR的含義:是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。
?。?)目的:獲取大量的目的基因
?。?)原理:DNA雙鏈復制
?。?)過程:
第①步:變性,加熱至90~95℃DNA解鏈為單鏈;(高溫解旋)
第②步:復性,冷卻到55~60℃,引物與兩條單鏈DNA結(jié)合;
第③步:延伸,加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成。
?。?)特點:指數(shù)形式擴增
第二步:基因表達載體的構(gòu)建(核心)
1.目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。
2.組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因
?。?)啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄mRNA。
(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端,使轉(zhuǎn)錄停止。
?。?)標記基因的作用:鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。
常用的標記基因是抗生素基因。
第三步:將目的基因?qū)胧荏w細胞_
1.轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。
2.常用的轉(zhuǎn)化方法:
將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ?農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。
將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛S玫姆椒ㄊ?顯微注射技術(shù)。方法的受體細胞多是 受精卵。
將目的基因?qū)胛⑸锛毎焊惺軕B(tài)細胞法:用 Ca2+ 處理細胞
?。ㄊ蛊涑蔀?感受態(tài)細胞 ,再將 重組表達載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程)
原核生物作為受體細胞的優(yōu)點: 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少
第四步:目的基因的檢測和表達
1.首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交(DNA-DNA)技術(shù)。
2.其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是采用分子雜交(DNA-RNA)技術(shù)。
3.最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是采用抗原—抗體雜交技術(shù)。
4.有時還需進行個體生物學水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。
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基因工程的應用
1.植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。
2.動物基因工程:提高動物生長速度;改善畜產(chǎn)品品質(zhì);用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物:如乳腺生物反應器和膀胱生物反應器,方法是將目的基因?qū)氩溉閯游锏氖芫阎?,使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。
3.基因治療是把正?;?qū)氩∪说捏w內(nèi),使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達到治療的目的,這是治療遺傳病最有效的手段。
4.基因診斷:又稱為DNA診斷,是采用基因檢測的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?;驍y帶病原體。
刷題鞏固
1、下列關(guān)于基因工程敘述正確的是( )
A.各種遺傳病的基因異常是不同的,同一遺傳病的基因異常是相同的
B.一種基因探針能檢測水體中的各種病毒
C.基因治療就是把缺陷基因誘變成正常基因
D.基因診斷的基本原理就是DNA分子雜交
解析:第一步,本題考查生物醫(yī)學知識。
第二步,基因診斷,又稱DNA診斷或分子診斷,該技術(shù)的基本原理是:互補的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈,即能夠進行DNA分子雜交。
因此,選擇D選項。